Genome Editing

CRISPR/Cas9 systems are engineered versions of the Cas9 protein and guide RNA.  Typically, they are identical to the Streptococcus pyogenes type II CRISPR systems, except that a single guide-RNA is used in place of the complementary crRNAs and tracrRNAs of the natural CRISPR system, and the Cas9 protein is codon-optimized for the cells intended to be transfected with the CRISPR/Cas9 system (Jinek et al. 2012).  For example, CRISPR/Cas9 expression plasmids used to edit the genome of human cells have codons optimized for human cells, and thus are called humanized Cas9 (hCas9) (Mali et al. Feb 2013).

Genome Editing Overview2

Figure 1: Natural vs. Engineered CRISPR systems. Natural CRISPR Pathway: 1. transcription of pre-crRNA and tracrRNA 2. binding of tracrRNA to pre-crRNA 3. cleavage of guide RNA from pre-crRNA 4. binding of inactive Cas9 nuclease to the guide RNA to produce the active Cas9 nuclease. Engineered CRISPR: 1. transcription of Guide RNA as a single sequence 2. transcription and translation of cas9 nuclease 3. binding of Guide RNA to Cas9 and Activation of Cas9 (original figure)

As the guide RNA sequence determines the cut site of the Cas9 nuclease with high specificity, the re-targeting of the CRISPR/Cas9 system to new sequences is far easier than re-targeting other engineered nucleases such as TALENs (transcription activator-like effector nuclease) or ZFNs (zinc finger nuclease). In fact, the cut site of a guide RNA-Cas9 nuclease complex can be reprogrammed to target just about any site that occurs immediately before a PAM sequence (5′-NGG-3′) (Cong et al. 2013).  In addition, the efficiency of the nuclease is comparable or greater than that of TALENs or ZFNs, which is remarkable given the high specificity of the nuclease (Mali et al. Feb 2013).  To understand how this high specificity and high efficiency are possible, check out our mechanism page.

Screen Shot 2015-11-16 at 12.39.03 PM

Figure 2: Cas9 cleaves DNA at a site specified by the protospacer adjacent motif (NGG) and the 20 nucleotide guide RNA complementary strand. (original figure)

Cas9, as a double-stranded DNA nuclease, can be used in conjunction with Homology-Directed Repair to insert new genes or DNA sequences into a genome (Mali et al. Feb 2013).

There are two distinct nuclease domains in Cas9 and therefore mutations in the active site of one nuclease can produce a DNA nickase that produces single strand breaks (Gasiunas et al. 2012).

Mutations in the active sites of both nuclease domains results in a non-catalytic Cas9.  This protein-RNA complex can bind specific sequences of DNA and localize other effector molecules to that region of DNA, which can carry out Transcriptional Control of the genome (Jinek et al. 2012).

 

 

92 Responses to Genome Editing

  1. Lipner says:

    So in essence you manipulate the inactive transcripted nuclease in order to mutate the rna via molecular charge whereby the neurons in the inactive nuclease begin a mutative proccess to eradicate the inacctive rna and in essence grow a new strand of DNA.

  2. زوليخة says:

    Thanks for all the great recipes,

  3. Ziane says:

    Amazing write-up! very nice…

  4. zoulikha says:

    I really like your blog.

  5. Zianezoz says:

    Beautiful article,

  6. Merci pour tout ce que tu partages!

  7. Ariel says:

    Harus brapa lama aku menunggumu

  8. ฝาก – ถอน เงินผ่านทางแอดมิน ที่ต้องคอยส่งสลิป ในไลน์ให้ยุ่งยากวุ่นวาย และยังต้องรอทางแอดมินทำการเติมเงินเข้าระบบให้อีก แต่วันนี้เราได้ทำการนำเข้าระบบการเติมเงิน แบบAuto ที่เรียกได้ว่าสะดวกสบายแบบสุดๆ

  9. rama says:

    It was really informative

  10. benazzi says:

    I absolutely love this site.

  11. rama says:

    Thank you ever so for you article.

  12. Chuck says:

    Very interesting, Wish to see much more like this. Thanks for sharing your information!

  13. benazzi says:

    Hiii; It is very good article. Thanks for writing this article.
    http://virtuelcampus.univ-msila.dz/facshs/

  14. rama says:

    We are really grateful for your blog post.

  15. benazzi says:

    Yipah ! C’est exactement ce que je cherchais !
    http://virtuelcampus.univ-msila.dz/facshs/

  16. boy says:

    What’s up to every body, it’s my first pay a visit of this blog; this weblog contains awesome and really
    good stuff for readers.

  17. rama says:

    We have benefited the subject thanks
    http://virtuelcampus.univ-msila.dz/facshs0………………..

  18. benazzi says:

    Wow great post! Thank you for sharing the information, its very helpful
    http://virtuelcampus.univ-msila.dz/facshs/

  19. rama says:

    You amazingly have terrific article content. Cheers for sharing your blog site. Thank you for sharing this

  20. rama says:

    You amazingly have terrific article content. Cheers for sharing your blog site. Thank you for sharing this

  21. whoah this blog is magnificent i like studying your articles.
    Keep up the great work! You already know, many people
    are hunting around for this information, you can help
    them greatly. http://thai-idol.com

  22. rama says:

    Thank you for the post.
    I’ll certainly comeback
    http://virtuelcampus.univ-msila.dz/facshs

  23. State Farm says:

    It is located in the United States.

  24. It’s awesome for me to have a web site, which is beneficial
    in favor of my experience. thanks admin

  25. Joseph Engle says:

    Great post. Articles that have meaningful and insightful comments are more enjoyable, at least to me. It’s interesting to read what other people thought.

  26. dara says:

    บทความที่ดีมากๆ

    vegus168

  27. แม้คุณเป็นคนที่สนใจข่าวสารบอล รวมถึงกีฬาชั้นแนวหน้าทั้งโลก และก็ติดตามเรื่องของผลบอล บ้านผลบอล
    อัพเดตเกี่ยวกับ ผลบอลสด ต่างๆแล้วล่ะก็เราขอแนะนำเว็บของเรา ที่ให้บริการอัพเดตข่าวสารเกี่ยวกับกีฬาบอลทุกลีกทุกการแข่งขันชิงชัยทั่วทั้งโลกไม่ว่าจะเป็น 5 ลีกบอลชั้นนำอย่าง พรีเมียร์ลีก อังกฤษ , ลาลีก้า ประเทศสเปน , กัลโช่ เซเรียอา
    อิตาลี , บุนเดสลีก้า
    เยอรมัน และก็ ลีกเอิง ฝรั่งเศส รวมไปถึงบรรดาลีกเล็กลีกรองต่างๆรวมทั้ง ลีกการแข่งขันของบอล ในบ้านเราอย่างฟุตบอล ไทยลีก ก็สามารถที่จะติดตามข่าวสารได้ทั้งสิ้น แล้วก็ยังสามารถอัพเดต โปรแกรมบอล
    จากทุกลีกผ่านเว็บไซต์ของเราได้สิ่งเดียวกัน คนใดกันพบกับใคร ที่แห่งไหน เมื่อไหร่ ทราบได้ก่อนคนไหนกันแน่อย่างแน่นอน

    อีกบริการหนี่งที่น่าสนใจที่เราได้ชี้แนะไปข้างต้นอย่าง ผลบอลสด
    ก็เป็นสิ่งที่เราต้องการเสนอแนะให้คุณเลือกใช้บริการผ่านทางเว็บ บ้านผลบอล ของพวกเราได้เช่นเดียวกัน
    เนื่องจากว่าที่เว็บของเรานั้นเพียงแค่คลิกครั้งเดียว ท่านก็จะสามารถติดตาม ผลที่ได้รับจากการแข่งขันฟุตบอลแบบสดๆได้ทุกลีก ที่มีอัพเดตแบบนาทีต่อนาที
    ครบทุกการแข่งขันชิงชัย โดยไม่จำเป็นที่จะจะต้องดาวน์โหลดแอพลิเคชั่นบนโทรศัพท์เคลื่อนที่
    เพื่อใช้งานอะไร ซึ่งนอกเหนือจากความสบายที่ตรงนี้แล้ว การต่อว่าดตาม ผลที่เกิดขึ้นจากการแข่งขันบอลผ่านเว็บ บ้านผลบอล ของพวกเรานั้นยังมีข้อดีที่เราอยากชี้แนะ ในรูปแบบอื่นๆอีกมากมายอาทิเช่น

    ทางเว็บไซต์รับประกันความถูกต้องแน่ใจ
    ของข้อมูลในทุกการแข่งขันชิงชัย
    สามารถใช้งานได้ตลอด 24 ชม ไม่มีข้อจำกัดสำหรับในการเข้าถึง
    นอกเหนือจากติดตามผลการแข่งขันยังสามารถสำรวจ ราคาบอล เพื่อการเดิมพันบอลได้ทุกคู่
    บริการทั้งหมดทั้งปวงของทางเว็บไซต์ ท่านสามารถเลือกใช้งานได้ทั้งหมด แบบไม่เสียค่าใช้จ่าย
    เว้นแต่เรื่องที่เกี่ยวข้องกับการอัพเดตผลของการแข่งขันบอล และก็ ข่าวที่พวกเราได้กล่าวไปก่อนหน้านี้แล้วเรื่องของ
    ทีเด็ดบอล ก็นับว่าเป็นอีกอย่างครับ ที่พวกเราอยากให้ท่านเลือกใช้งานเว็บของพวกเรา เนื่องจากเราได้เก็บบท วิเคราะห์บอล จากเซียนพนันชั้นหนึ่งจากทั่วราชอาณาจักรเอาไว้ให้ผู้ใช้งานทุกคนสามารถเลือกรับชมได้อย่างจุใจ ซึ่งที่ตรงนี้ก็เหมาะมากกับผู้ใช้งานที่ชอบด้านการเดิมพันฟุตบอลออนไลน์ เนื่องจากว่าอย่างที่รู้กันครับว่าเรื่องของ ทีเด็ดฟุตบอลนั้น เป็นตัวช่วยสำคัญที่คนเดิมพันบอลโดยมากเลือกใช้กันอยู่แล้ว โดยเหตุนั้นการที่เราสะสม บทวิเคราะห์ หรือ ทัศนะ ต่างๆจากคนเล่นการพนันชั้นหนึ่ง ที่เรียกว่าเป็น ข้ารูบอล
    ของ ลีกนั้นๆเอาไว้อย่างสมบูรณ์ ก็น่าจะเป็นอะไรที่มอบความสบายสบาย รวมทั้ง คุณประโยชน์ให้กับผู้ที่ชื่นชอบการเดิมพันฟุตบอลออนไลน์ ทุกท่านได้อย่างแน่แท้

  28. dara says:

    สมัครสมาชิก คลิ๊ก
    ซุปเปอร์สล็อต369

  29. It’s a lot of fun to drift and drive amazing automobiles! Discover breathtaking maps, and hunt down all of your favorite drift sites. Experiment with your car’s performance.

  30. The tale of Cookie Clicker enables me to finally comprehend what he was trying to say because we all thought he was strange for doing it.

  31. Magy Magy says:

    Thanks for the post! Genes are such an interesting subject of study. The most interesting literature and articles just on this topic. Thanks

  32. sandra says:

    I hope this innovation develops even further!!

    Toto hongkong

  33. Slope Game says:

    Put Slope Game on Top gg guys!

  34. I was looking it for so long , and i found it finally that i know it will help me .
    https://www.powerballsite.com

  35. This type of article that enlighted me all throughout and thanks for this.This going to be excitement and have fun to read. thank to it. check this out to for further exciting.
    https://www.bacarasite.com

  36. MACAU VIP says:

    เล่นสล็อตออนไลน์ อันดับ 1 กับ Macau Vip สุดยอดเว็บเดิมพันเว็บตรง สมัครareaslot รับสิทธิพิเศษมากมาย ค่าย area slot รวมเกมสล้อตแตกดี สล็อตวอเลท ฝากถอนสะดวก ตลอด 24ชม. ทางเข้าareaslot เล่นได้ทุกที่ ต้อง macau vip เท่านั้น

  37. I appreciate your post. The study of genes is quite fascinating. The most fascinating books are written by experts wikipedia page writers, and articles on this subject alone.

  38. mark says:

    Hello, if you want to not only have fun, but also earn money, I recommend this Sports Betting, A wide range of Bonuses and promotions. Good luck to all okbet manila

  39. This paragraph gives clear idea for the new viewers of blogging, it give me a lot of idea, thank you for sharing and cooperation, keep it up,
    https://main7.net/first/

  40. Waffle game says:

    Your article is awesome. It is exactly what I was looking for. I also want to recommend to everyone

  41. smmdepot.com says:

    If you would like to take a good deal from this article then you have to
    apply these strategies to your won webpage.

  42. Balonesia says:

    Veru nice article, thank you/

  43. Jual Plakat says:

    This article that enlighted me all throughout and thanks for this.This going to be excitement and have fun to read. thank to it. check this out to for further exciting.

  44. awesome article, thank you

  45. Startup Noon says:

    I realize it is only now writing a blog is extremely helpful for me as well as for my work. I would like to say thanks to much to you. Awesome post! Really enjoyed this post. But I want more information on such valuable topic. picuku

  46. Emily Joseph says:

    Gene editing is performed using enzymes, particularly nucleases that have been engineered to target a specific DNA sequence, where they introduce cuts into the DNA strands, enabling the removal of existing DNA and the insertion of replacement DNA. livestreaming cdn

  47. เว็บเกมสล็อตเล่นง่าย มั่งมีเร็ว 2022 รวมสล็อตสล็อตแตกง่าย 2022 ไว้ภายในเว็บไซต์เดียว
    ใช้ทุนเดิมพันต่ำที่สุด เหมาะสมกับผู้เล่นทุกคน สมาชิกใหม่รับโบนัส
    100% เพื่อนำไปสร้างความสนุกสนาน รวมทั้งลุ้นรับรางวัลโบนัสแจ็คพอตใหญ่มากมายภายในเกม ฉะนั้น
    ไม่ว่าจะเป็นนักลงทุนที่มีทุนน้อย ทุนมากมาย ก็สามารถร่วมบันเทิงใจกับเกม สล็อตออนไลน์ ในเว็บของพวกเราได้
    เว็บไซต์สล็อตแตกง่าย ที่จะมอบรางวัลพรั่งพร้อมให้แก่นักเดิมพัน ให้ได้เลือกใช้บริการที่มีมาตรฐานการคลังป้อมปราการอาจจะ ไม่เป็นอันตราย มีการจ่ายสูงสุดทุกยอด เพราะเกมสล็อตออนไลน์ที่เว็บไซต์ของพวกเรา เปิดให้บริการในรูปแบบออนไลน์ ที่ผู้เล่นสามารถเข้าไปใช้งานได้จากเครื่องไม้เครื่องมือต่างๆทั้งยังคอมพิวเตอร์ PC แท็บแลต หรือแม้กระทั้งวัสดุอุปกรณ์อย่าง โทรศัพท์เคลื่อนที่สมาร์ทโฟน ก็สามารถใช้งานได้ แถมยังมีการรองรับทั้งระบบ iOS แล้วก็ Android เพื่อคุณ เข้าเล่นเกมสล็อต ได้ผ่านทุกแพลตฟอร์มตลอด 1 วัน สล็อตเว็บตรงไม่ผ่านเอเย่นต์ pg

  48. 바카라 says:

    놀다 바카라 지금 온라인으로 라이브하고 놀라운 보너스를 받으세요

  49. jerrell emard says:

    Page365 is a multi-service platform that can improve and help any online live selling busines.
    Are you an owner that do dropshipping business? Or selling on shopee?
    Want to promote marketing using facebook ads?
    Are you an aspiring business owner that is looking for good business idea?
    Visit Page365 now!

Leave a Reply

Your email address will not be published.

Looking for something?

Use the form below to search the site:


Still not finding what you're looking for? Drop a comment on a post or contact us so we can take care of it!

Visit our friends!

A few highly recommended friends...

    Archives

    All entries, chronologically...

    Set your Twitter account name in your settings to use the TwitterBar Section.